期刊简介
《按摩与康复医学》杂志创刊于1985年，是经中华人民共和国国家新闻出版总署批准注册的正式公开出版物。本杂志是由广东省卫生厅、广东省中医药局主管主办，由中华中医药学会、中国康复医学会等协办的国家级优秀医学科技期刊。本杂志现为旬刊，每月面向国内外公开出版发行3期。开设栏目： 专家论坛、基础研究、临床研究、康复论坛、综述、内外妇儿科临床与康复、骨科临床与康复、肿瘤临床与康复、康复教育与管理、学科建设、康复与护理、中西医结合、按摩与推拿、医药研究与检验等栏目。
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首页>按摩与康复医学杂志
- 杂志名称：按摩与康复医学杂志
- 主管单位：广东省中医药局
- 主办单位：广东省第二中医院（广东省中医药工程技术研究院）
- 国际刊号：1008-1879
- 国内刊号：44-1667/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊收录：上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), 万方收录(中)
t-PA基因慢病毒表达载体的构建及其在内皮祖细胞中的表达研究
方立；黄钦；李迎；祁珩；黄芳
关键词：基因克隆, 组织纤溶酶原激活物, 慢病毒表达载体, 内皮祖细胞
摘要：目的:构建t-PA基因慢病毒表达载体并转染脐血来源的内皮祖细胞,评估其转染后功能变化情况.方法:RT-PCR获得t-PA cDNA,将真核表达质粒pcDNA3.1(+)和t-PA基因片段分别双酶切,构建pcDNA3.1(+)/t-PA质粒.对其进行酶切鉴定和测序,使目的基因连接入载体质粒中,构建成重组慢病毒载体质粒,制备包装病毒质粒转染内皮祖细胞.倒置荧光显微镜下观察转染24h后内皮祖细胞中绿色荧光蛋白的表达情况,RT-qPCR和Western blot检测转染后t-PA基因的表达水平.采用Brdu标记细胞DNA、BCA蛋白定量、MTT分析法检测内皮祖细胞DNA合成能力、总蛋白含量和细胞存活率.结果:成功构建了含有t-PA基因cDNA序列的慢病毒表达载体pLenti6.3-t-PA,DNA测序结果完全正确,倒置荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达,内皮祖细胞转染重组慢病毒后t-PA表达水平比未转染组显著增高(P＜0.01).t-PA慢病毒表达载体转染内皮祖细胞后,内皮祖细胞DNA合成能力、细胞总蛋白含量、细胞存活率均较对照组无明显变化.结论:成功构建t-PA基因慢病毒表达系统,转染内皮祖细胞后对其DNA合成、总蛋白合成、细胞存活率无明显影响.
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